CRISPR/Cas13a具有RNA引導的(of)RNA切割能力，RNA引導反式核酸内切酶活性是(yes)高度特異的(of)，高效切割ssRNA，每個(indivual)激活Cas13a蛋白可以(by)識别10⁴ 拷貝RNA。CRISPR/Cas13a強大(big)信号放大(big)能力使RNA檢測靈敏度能夠降低到(arrive)飛摩爾（10^-15M）水平。

1、CLISA檢測原理

CLISA（CRISPR/Cas signal amplification Linked ImmunoSorbent Assay）是(yes)CRISPR-based單分子免疫診斷技術平台，靈敏度達fM或fg/mL，高于(At)ELISA 1,000倍，精準分析多種疾病的(of)超低濃度生(born)物标志物。

結合“三明治結構”免疫結合機制，用(use)含有T7啓動子序列生(born)物素化雙鏈DNA（dsDNA）取代酶放大(big)體系。T7聚合酶識别啓動子序列進行轉錄，産生(born)大(big)量單鏈RNA分子拷貝。crRNA識别轉錄RNA分子導緻CRISPR/Cas13反式切割活性激活。兩端熒光團和(and)猝滅基團标記的(of)短ssRNA報告探針通過反式切割活性被切割。

相較ELISA免疫檢測方法，CLISA利用(use)T7轉錄放大(big)分子數，CRISPR剪切放大(big)信号，靈敏度提升1,000倍，檢測限達fg/mL。

      2、主要(want)試劑組分

3、試劑盒檢測性能

 反應時(hour)間：3小時(hour)  (免疫反應0.5小時(hour)，轉錄反應1小時(hour)，Cas熒光信号檢測0.5小時(hour)。)

 線性範圍：50fg/mL~5ng/mL

 最低檢測限：10fg/mL

4. 開發産品線

       CLISA主要(want)用(use)于(At)開發fmol或fg/mL濃度的(of)蛋白标志物臨床診斷産品。